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Cygnus新品上市 | AccuRes? 宿主細(xì)胞DNA定量試劑盒

在生物制品的生產(chǎn)過程中，宿主細(xì)胞DNA可能會(huì)殘留其中，這將會(huì)導(dǎo)致致癌基因或其他風(fēng)險(xiǎn)的遺傳物質(zhì)進(jìn)入到最終的藥物制劑中。為了降低這種風(fēng)險(xiǎn)，監(jiān)管機(jī)構(gòu)規(guī)定了允許殘留的HCD限度，根據(jù)所使用的細(xì)胞系及給藥方案的不同，允許的HCD殘留范圍在10~100pg/劑量之間。關(guān)于HCD殘留的檢測(cè)，《中國(guó)藥典2025》通則3407中列出了三種方法，分別是DNA探針雜交法、熒光染色法，以及定量PCR法。而USP General Chapter <509>“Residual DNA Testing”章節(jié)中建議使用基于探針的DNA定量作為驗(yàn)證方法，用于檢測(cè)在大腸桿菌（E. coli）或中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢（CHO）細(xì)胞系中生產(chǎn)的重組生物制品，以確保更好的靈敏度和準(zhǔn)確性。在整個(gè)生產(chǎn)過程中，質(zhì)控人員需要對(duì)DNA水平進(jìn)行評(píng)估，這些樣本可能含有其他雜質(zhì)和高濃度的藥物活性成分，因此必需一種可靠且靈敏的DNA定量方法。 2025版中國(guó)藥典新增多個(gè)單抗藥物的HCD檢測(cè)要求：注射用曲妥珠單抗、英夫利西單抗、阿達(dá)木單抗、貝伐珠單抗、利妥昔單抗等，以及部分疫苗類（如 Sabin 株脊髓灰質(zhì)炎滅活疫<50pg每劑）均明確要求采用通則3407第三法（定量PCR法）進(jìn)行檢測(cè)。同時(shí)新增 <人用抗體偶聯(lián)藥物制品總論>，抗體偶聯(lián)藥物（ADC）納入監(jiān)管，明確規(guī)定需要對(duì)外源性雜質(zhì)進(jìn)行監(jiān)控。 Cygnus Technologies新推出的AccuRes?系列DNA定量試劑盒，專為用CHO、人或E. coli 細(xì)胞系重組表達(dá)生產(chǎn)的生物制品中HCD殘留檢測(cè)而設(shè)計(jì)。高濃度樣品可通過最小程度的稀釋后進(jìn)行檢測(cè)，從而有效降低檢測(cè)限（LOD）。 Cygnus AccuRes?系列HCD檢測(cè)試劑盒的優(yōu)勢(shì)特點(diǎn)： ? 準(zhǔn)確性—探針法qPCR保證了針對(duì)目標(biāo)細(xì)胞系(如CHO, HEK,E. coli 等)HCD檢測(cè)的特異性，避免目標(biāo)HCD的漏檢； ? 更好的精確度—CleanAmp&reg; dNTPs與熱啟動(dòng)Taq DNA聚合酶體系可有效降低PCR擴(kuò)增過程中的非特異性啟動(dòng)； ? 靈活性—兼容所有能檢測(cè)FAM熒光信號(hào)的qPCR設(shè)備，降低額外購(gòu)置設(shè)備的成本 ? All-in-one kit支持從樣品到qPCR的全過程—試劑盒中包含了DNA提取試劑（試管法或孔板法），AccuRes? PCR體系預(yù)混液，引物/探針預(yù)混液和DNA標(biāo)準(zhǔn)品 ? 靈敏度—LOD為0.6 fg/μl。 Cygnus AccuRes?系列HCD檢測(cè)試劑盒操作流程 DNA提取 Cygnus的DNA提取方法采用了一種新型DNA carrier，能夠從痕量水平的殘留DNA中回收HCD，并在無蛋白質(zhì)、鹽和洗滌劑污染的環(huán)境中進(jìn)行DNA檢測(cè)和定量。這比其他提取方法提高了DNA檢測(cè)和擴(kuò)增的可重復(fù)性和穩(wěn)定性。 擴(kuò)增 Cygnus AccuRes? 系列試劑盒中采用高特異性引物/探針體系對(duì)目標(biāo)HCD進(jìn)行擴(kuò)增。帶有FAM熒光標(biāo)記的核酸探針在每一次PCR反應(yīng)循環(huán)中被BHQ-1? 淬滅。先進(jìn)的 CleanAmp&reg; dNTPs與熱啟動(dòng)Taq DNA聚合酶反應(yīng)體系降低了非特異性擴(kuò)增，進(jìn)一步確保了qPCR擴(kuò)增的特異性，靈敏度與穩(wěn)定性，同時(shí)qPCR體系的配置可以在室溫條件下操作。 定量 試劑盒標(biāo)準(zhǔn)品的ct值構(gòu)建的標(biāo)準(zhǔn)曲線可將檢測(cè)結(jié)果計(jì)算為pg/10μl宿主細(xì)胞殘留DNA，進(jìn)而可將HCD濃度換算為ng/mL, ng/mg或是ng/劑量。基于該方法，殘留DNA最低可定量的濃度為0.6 fg/µL。 Cygnus AccuRes?系列HCD檢測(cè)試劑盒測(cè)試數(shù)據(jù) 準(zhǔn)確性與可重復(fù)性測(cè)試。由兩名操作員（A和B）分別在兩天內(nèi)對(duì)已知DNA樣本進(jìn)行兩次檢測(cè)，計(jì)算檢測(cè)結(jié)果的SD, CV和回收率%（見下表）。 完整的和不同程度降解的CHO DNA的提取與擴(kuò)增效果對(duì)比。將完整的gDNA（Control）與分別用Alu1酶處理30min、1h、1.5h和2h后的DNA（Digested）凝膠電泳圖像。對(duì)照組和酶處理30min組樣品擴(kuò)增的線性范圍基本一致（如下圖）。 存在外源DNA的情況下，CHO引物/探針仍具有廣泛的線性范圍和特異性。不同濃度的E. coli DNA不會(huì)影響CHO DNA的標(biāo)準(zhǔn)曲線（如下圖）。 過程樣品與藥物原液（DS）檢測(cè)結(jié)果對(duì)比。對(duì)比含有1 mg/mL陰離子交換或陽(yáng)離子交換純化的蛋白樣品或藥物蛋白的CHO DNA回收率（見下表）。 Cygnus AccuRes?系列HCD檢測(cè)試劑盒訂購(gòu)信息 產(chǎn)品名稱 貨號(hào) 規(guī)格 CHO AccuRes? DNA Quantification Kit in Tubes D1555T 1 kit CHO AccuRes? DNA Quantification Kit in Wells D1555W 1 kit CHO AccuRes? Quantitative DNA Kit D1555 1 kit E. coli AccuRes? DNA Quantification Kit D1415 1 kit Human AccuRes? Quantitative DNA Kit D1165 1 kit 即將上市： 產(chǎn)品名稱 貨號(hào) 規(guī)格 Vero AccuRes? DNA Quantification Kit in Tubes D1975 1 kit NS/0 AccuRes? DNA Quantification Kit in Wells D1225 1 kit SF9 AccuRes? Quantitative DNA Kit D1845 1 kit P. pastoris AccuRes? Quantitative DNA Kit D1145 1 kit Cygnus Technologies, LLC.為生物技術(shù)和生物制藥行業(yè)提供產(chǎn)品和分析方法，旨在加速研發(fā)階段和提高產(chǎn)品質(zhì)量。Cygnus開發(fā)和生產(chǎn)的生物工藝殘留試劑盒，用于檢測(cè)超過50種不同表達(dá)系統(tǒng)的特異性雜質(zhì)。Cygnus作為專注于生物技術(shù)應(yīng)用免疫檢測(cè)的高靈敏度分析技術(shù)的專家，Cygnus的產(chǎn)品和服務(wù)已經(jīng)被幾乎所有主要的生物制藥公司使用超過25年。 北京西美杰科技有限公司作為Cygnus在中國(guó)總代理，與國(guó)內(nèi)眾多知名藥企，CRO/CMO企業(yè)建立了長(zhǎng)久穩(wěn)定的合作關(guān)系。多年來西美杰的產(chǎn)品及服務(wù)幫助許多企業(yè)加速R&D階段，提高藥物質(zhì)量、純度和安全，加速優(yōu)化研發(fā)工藝，減少產(chǎn)品上市時(shí)間，降低QC成本。如您對(duì)上述產(chǎn)品感興趣，歡迎致電西美杰客服熱線400-050-4006或者登陸網(wǎng)站www_xmjsci_com.zenprotocolpool.com了解更多信息。 更多>

技術(shù)前沿 | 用于CGT及疫苗開發(fā)的新型合成DNA技術(shù)4basebio

酶法合成DNA技術(shù)近年來在細(xì)胞和基因治療以及疫苗開發(fā)領(lǐng)域取得了顯著進(jìn)展。這種創(chuàng)新方法旨在通過提供高質(zhì)量、高純度的合成DNA，逐步取代傳統(tǒng)的質(zhì)粒DNA生產(chǎn)方式。與質(zhì)粒DNA相比，酶法合成DNA具有更高的可擴(kuò)展性、更低的雜質(zhì)風(fēng)險(xiǎn)以及更靈活的設(shè)計(jì)能力，使其成為臨床試驗(yàn)和治療應(yīng)用的理想選擇。酶法合成DNA廣泛應(yīng)用于多種前沿生物技術(shù)領(lǐng)域，包括腺相關(guān)病毒（AAV）載體生產(chǎn)、慢病毒載體構(gòu)建、DNA疫苗開發(fā)、mRNA治療及疫苗制備，以及基于CRISPR等技術(shù)的基因編輯工具設(shè)計(jì)。 4basebio開發(fā)的新型合成DNA技術(shù)在基因工程領(lǐng)域取得了突破性進(jìn)展，成功克服了當(dāng)前質(zhì)粒及其他傳統(tǒng)DNA技術(shù)所面臨的諸多瓶頸與挑戰(zhàn)。傳統(tǒng)的DNA生產(chǎn)通常依賴于細(xì)菌發(fā)酵等生物技術(shù)手段，這些方法雖然成熟但存在明顯的局限性，例如生產(chǎn)周期較長(zhǎng)、質(zhì)量控制復(fù)雜以及難以滿足大規(guī)模定制化需求等問題。而4basebio的全酶促生產(chǎn)工藝則完全摒棄了對(duì)活細(xì)胞的依賴，通過精確設(shè)計(jì)和調(diào)控酶促反應(yīng)，實(shí)現(xiàn)了對(duì)DNA合成過程的高度可控性。這種方法不僅可以生產(chǎn)更長(zhǎng)、更復(fù)雜的DNA序列，還能確保產(chǎn)物的純度和穩(wěn)定性，從而更好地支持基因治療和疫苗開發(fā)中的多樣化需求。這種新技術(shù)不僅具備高效率和高產(chǎn)量的特點(diǎn)，還大幅縮短了生產(chǎn)周期，使得DNA的批次交付時(shí)間從以往的數(shù)月縮減至數(shù)周，極大地提高了研發(fā)效率并降低了時(shí)間成本。 4basebio合成DNA相較傳統(tǒng)質(zhì)粒DNA的優(yōu)勢(shì) ? 更具有經(jīng)濟(jì)效益：降低人力與物料成本，簡(jiǎn)化工藝流程，專利酶技術(shù)實(shí)現(xiàn)更低的綜合成本與更高的質(zhì)量控制。 ? 更加安全：無細(xì)菌骨架，無抗生素抗性基因，內(nèi)毒素污染風(fēng)險(xiǎn)低，無宿主細(xì)胞污染物。 ? 生產(chǎn)規(guī)模靈活可控：?jiǎn)闻紊a(chǎn)從μg到g級(jí)別可控，適用于多構(gòu)建體的快速篩選，無批次失敗風(fēng)險(xiǎn)。 ? 高效快速獲得DNA：基于快速高產(chǎn)能的酶促工藝，無需建立細(xì)胞庫(kù)與復(fù)雜工藝，標(biāo)準(zhǔn)化（DSP）生產(chǎn)，產(chǎn)能為質(zhì)粒DNA的2倍。 ? 兼容多種應(yīng)用方向：4種DNA構(gòu)建體滿足多樣化應(yīng)用需求。 ? 序列靈活性：適用于復(fù)雜序列（如ITRs，poly A tail等），適用于≥10kb的長(zhǎng)序列，適用于對(duì)細(xì)菌有毒的序列。 4basebio的新型合成DNA技術(shù)應(yīng)用范圍廣泛，涵蓋了從基礎(chǔ)科學(xué)研究到臨床試驗(yàn)的多個(gè)階段。例如，在基因編輯工具的開發(fā)中，高質(zhì)量的線性DNA構(gòu)建體可以作為理想的載體或模板；而在疫苗研發(fā)領(lǐng)域，快速生成特定序列的DNA能夠顯著加快抗原篩選和驗(yàn)證的速度。因此，4basebio的這項(xiàng)創(chuàng)新不僅提升了DNA合成技術(shù)的整體水平，也為推動(dòng)全球健康事業(yè)的發(fā)展提供了強(qiáng)有力的技術(shù)支撐。 4basebio可提供4種針對(duì)不同應(yīng)用方向的線性DNA構(gòu)建體 hpDNA——用于病毒載體或非病毒載體生產(chǎn) 這種DNA結(jié)構(gòu)特別適用應(yīng)用于病毒載體或非病毒載體生產(chǎn)，能夠高效生成復(fù)雜的序列（如ITRs，LTRs等），同時(shí)還可以有效避免序列缺失或重組的風(fēng)險(xiǎn)，從而確保序列的完整性。此外，由于構(gòu)建體中不含任何細(xì)菌來源序列，因此可以杜絕反向包裝的風(fēng)險(xiǎn)。 opDNA——用于mRNA疫苗及治療藥物生產(chǎn) 3’端開口設(shè)計(jì)的DNA模板非常適用于體外轉(zhuǎn)錄，從而生產(chǎn)出適用于疫苗開發(fā)和治療性藥物的高質(zhì)量mRNA。通過將連續(xù)的poly（A）尾直接編碼至DNA模板中，可以省略轉(zhuǎn)錄后加尾步驟，從而簡(jiǎn)化生產(chǎn)工藝。此外，開口DNA（opDNA）技術(shù)能夠確保生成均一且高純度的mRNA產(chǎn)品。 oeDNA——體內(nèi)應(yīng)用 開放式DNA構(gòu)建體能夠生成平末端、突出末端或兩者的任意組合形式。與4basebio的其他DNA產(chǎn)品類似，開放式DNA具備抵抗外切酶降解的特性，因此在體內(nèi)應(yīng)用中表現(xiàn)出較高的穩(wěn)定性與適用性。 ssDNA——體外與體內(nèi)應(yīng)用 單鏈DNA（ssDNA）是一種線性單鏈DNA分子，其3'-和5'-端均具有抗外切酶降解的能力，因此在體外實(shí)驗(yàn)和體內(nèi)應(yīng)用中均表現(xiàn)出較高的穩(wěn)定性與適用性。 4basebio作為一家專注于基因治療和遞送解決方案的公司，憑借其先進(jìn)的技術(shù)和深厚的專業(yè)知識(shí)，能夠?yàn)榭蛻籼峁脑牧瞎?yīng)到工藝優(yōu)化的一站式支持。無論您是需要確保DNA產(chǎn)品的質(zhì)量穩(wěn)定性，還是希望改進(jìn)基因有效載荷向目標(biāo)細(xì)胞的遞送效率，4basebio都能根據(jù)具體需求量身定制解決方案，助力客戶加速治療方案的研發(fā)進(jìn)程。隨著全球?qū)€(gè)性化醫(yī)療和高效疫苗的需求不斷增長(zhǎng)，酶法合成DNA技術(shù)的應(yīng)用前景愈發(fā)廣闊。它不僅有助于降低生產(chǎn)成本，還能提高產(chǎn)品質(zhì)量和一致性，從而更好地滿足臨床試驗(yàn)和商業(yè)化生產(chǎn)的嚴(yán)格要求。這一技術(shù)的進(jìn)步正在重新定義基因治療和疫苗開發(fā)的標(biāo)準(zhǔn)，為未來的醫(yī)療創(chuàng)新奠定堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ)。 北京西美杰科技有限公司是4basebio中國(guó)區(qū)總代理，如需了解4basebio服務(wù)相關(guān)問題，歡迎撥打西美杰客服熱線400-050-4006或登錄網(wǎng)站www_xmjsci_com.zenprotocolpool.com了解更多信息。 更多>

老友新貌-AppliChem IPEC級(jí)產(chǎn)品介紹

IPEC（國(guó)際藥用輔料協(xié)會(huì)，International Pharmaceutical Excipients Council）是一個(gè)全球性的非營(yíng)利性行業(yè)組織，由全球五大區(qū)域性協(xié)會(huì)組成：IPEC美國(guó)、IPEC歐洲、IPEC日本、IPEC中國(guó)、IPEC印度，致力于制定藥用輔料的質(zhì)量、安全和管理標(biāo)準(zhǔn)。IPEC級(jí)別的產(chǎn)品通常指符合IPEC-PQG GMP指南或其他IPEC標(biāo)準(zhǔn)的藥用輔料，確保其在制藥行業(yè)中的適用性和安全性。 IPEC協(xié)會(huì)的相關(guān)者 IPEC級(jí)別的輔料必須符合以下核心標(biāo)準(zhǔn)： （1）GMP合規(guī)性 ? 生產(chǎn)符合IPEC-PQG GMP指南（或等效標(biāo)準(zhǔn)） ? 確保生產(chǎn)環(huán)境、設(shè)備、工藝和文件管理符合GMP要求 （2）安全性評(píng)估 ? 符合IPEC安全性評(píng)估指南，確保輔料在藥品中的安全性 ? 提供毒理學(xué)數(shù)據(jù)（如：ICH-Q3D元素雜質(zhì)控制） （3）供應(yīng)鏈可追溯性 ? 符合IPEC GDP（良好分銷規(guī)范），確保運(yùn)輸和儲(chǔ)存符合要求。 ? 提供完整的批次記錄和檢驗(yàn)報(bào)告（COA） （4）藥典合規(guī)性 ? 符合USP/EP/JP/ChP等藥典標(biāo)準(zhǔn)（如微生物限度、重金屬、殘留溶劑等）。 因此，IPEC級(jí)別產(chǎn)品具有以下優(yōu)勢(shì)： 優(yōu)勢(shì) 說明 高質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) 符合國(guó)際GMP和藥典要求，確保輔料質(zhì)量穩(wěn)定 安全性保障 經(jīng)過嚴(yán)格的安全性評(píng)估，降低藥品風(fēng)險(xiǎn) 供應(yīng)鏈可靠 符合GDP標(biāo)準(zhǔn)，確保運(yùn)輸和儲(chǔ)存合規(guī) 全球認(rèn)可 適用于FDA、EMA、NMPA等監(jiān)管市場(chǎng) 減少審批障礙 制藥企業(yè)更容易通過監(jiān)管審核 IPEC級(jí)別的藥用輔料是制藥行業(yè)的高標(biāo)準(zhǔn)產(chǎn)品，符合國(guó)際GMP、安全性評(píng)估和供應(yīng)鏈管理要求。PanPeac AppliChem作為歐洲領(lǐng)先的生化試劑與制藥原料供應(yīng)商，不斷優(yōu)化其IPEC級(jí)產(chǎn)品線，并于2025年成為了IPEC Europe正式成員。 PanPeac AppliChem產(chǎn)品詳情如下表。 貨號(hào) 貨名 CAS號(hào) 631339 Glycerol(Ph.Eur,BP,USP)IPEC grade 甘油 56-81-5 631404 MagnesiumSulfate7-hydrate(Ph.Eur,BP)IPEC grade七水合硫酸鎂 10034-99-8 631396 MagnesiumChloride6-hydrate(Ph.Eur.,BP)IPEC grade 六水合氯化鎂 7791-18-6 631632 SodiumAcetate3-hydrate(Ph.Eur,BP,USP)IPEC grade 三水合醋酸鈉 6131-90-4 631638 SodiumHydrogenCarbonate(Ph.Eur,BP,USP)IPEC grade 碳酸氫鈉 144-55-8 631655 tri-SodiumCitrate2-hydrate(Ph.Eur,BP,USP)IPEC grade 檸檬酸三鈉2-水合物 6132-04-3 637763 N-Acetyl-DL-Tryptophan(Ph.Eur,BP)lowendotoxin,IPEC grade N-乙酰-DL-色氨酸 87-32-1 631659 SodiumChloride(Ph.Eur,BP,USP,JP)lowendotoxin,IPEC grade 氯化鈉 7647-14-5 636454 SodiumCaprylate(USP-NF,BP,Ph.Eur.,ChP)lowendotoxin,IPEC grade 辛酸鈉 1984-06-1 參考資料：IPEC官方網(wǎng)站：www.ipec.org IPEC-PQG GMP指南 USP/EP/ChP藥典標(biāo)準(zhǔn) 更多>

星品推薦 | 紅色熒光蛋白mCherry/tdTomato抗體

西美杰代理的SICGEN品牌提供的Anti-mCherry和Anti-tdTomato均為從圓盤珊瑚中提取的紅色熒光蛋白的多克隆抗體。tdTomato是由兩個(gè)mCherry單體串聯(lián)表達(dá)的二聚體，因其熒光比mCherry更強(qiáng)且對(duì)細(xì)胞/小鼠等沒有明顯毒性，因此更常用于活體實(shí)驗(yàn)。Anti-mCherry和Anti-tdTomato兩種抗體的抗原均是大腸桿菌表達(dá)的重組多肽純化而來，用Western blot檢測(cè)轉(zhuǎn)染了兩種蛋白的HEK293細(xì)胞，分別可檢測(cè)到29kda和55kda的條帶。Anti-tdTomato抗體對(duì)tdTomato和mCherry均有特異性，但與綠色熒光蛋白(GFP)不發(fā)生交叉反應(yīng)。 更多>

Jena Bioscience高性能高純度蛋白酶K

蛋白酶K是一種高活性、穩(wěn)定的絲氨酸蛋白酶，切割特異性低，具有非常廣泛的裂解特異性。這種分子量為28.9 kDa的蛋白質(zhì)能裂解脂肪族和芳香族氨基酸羧基附近的肽鍵。蛋白酶K廣泛應(yīng)用于分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中，主要的功能是通過水解肽鍵降解蛋白質(zhì)，尤其擅長(zhǎng)分解變性或交聯(lián)的蛋白質(zhì)。它在DNA/RNA提取、細(xì)胞裂解、去除核酸酶污染等過程中發(fā)揮關(guān)鍵作用。Jena Bioscience的蛋白酶K性能卓越、純度高，是蛋白消化和核酸分離的理想選擇，同時(shí)提供即用型溶液和多功能粉末包裝。品牌 貨號(hào) 品名 規(guī)格 JenaBioscience EN-178S Proteinase K- Solution 2 x 1 ml JenaBioscience EN-178SL Proteinase K- Solution 10 x 1 ml JenaBioscience EN-181-1G Proteinase K- Solid 1g JenaBioscience EN-181-10G Proteinase K- Solid 10 x 1 g 產(chǎn)品特性 來源：重組，來自白色念球菌 CAS: 39450-01-6 EC number: 254-457-8 純度：高純，無DNA酶、無RNA酶 蛋白酶K溶液酶活：> 600 units/ml 蛋白酶K粉末酶活：> 30 units/mg 保存條件：-20 °C保存，避免重復(fù)凍融產(chǎn)品優(yōu)勢(shì) 高穩(wěn)定性：可在去垢劑和高溫等多種條件下使用 特異性廣泛：能夠高效降解各種蛋白質(zhì) 高純度：純度高，污染低，減少下游壓力 包裝靈活：可提供即用型溶液和穩(wěn)定的粉末北京西美杰科技有限公司為Jena Bioscience中國(guó)代理，為客戶提供完善的技術(shù)支持與售后服務(wù)。歡迎撥打西美杰客服電話400-050-4006或者登陸網(wǎng)站Jena Bioscience由德國(guó)馬普所(MPI)的知名分子生物學(xué)家于1998年共同創(chuàng)辦，致力于為全球的科研院所，醫(yī)院，制藥企業(yè)和診斷試劑盒生產(chǎn)企業(yè)提供各類試劑與原料, 供應(yīng)特色標(biāo)記核苷酸/類核苷，標(biāo)記熒光探針、點(diǎn)擊化學(xué)、蛋白結(jié)晶等產(chǎn)品，分別通過DIN EN ISO 9001，DIN EN ISO 14001，EMAS認(rèn)證，質(zhì)量被80多個(gè)國(guó)家客戶認(rèn)可。 品牌優(yōu)勢(shì)：以核苷，核苷酸類似物為特色的產(chǎn)品種類齊全：核苷，核苷酸及類似物，蛋白及蛋白表達(dá)系統(tǒng)，點(diǎn)擊化學(xué)試劑，生物大分子結(jié)構(gòu)研究相關(guān)試劑，分子生物學(xué)和生物化學(xué)相關(guān)試劑強(qiáng)大的技術(shù)團(tuán)隊(duì)可提供高質(zhì)量定制服務(wù)產(chǎn)品質(zhì)量有保障，通過多種認(rèn)證產(chǎn)品和服務(wù)被80多個(gè)國(guó)家客戶認(rèn)可主要產(chǎn)品分類：核苷、核苷酸類似物： 標(biāo)記核苷酸、脫氧/雙脫氧核糖核苷酸、核苷酸類似物點(diǎn)擊化學(xué)：帶有點(diǎn)擊基團(tuán)的核苷酸、熒光素、生物素、ATP類似物等；蛋白結(jié)構(gòu)相關(guān)產(chǎn)品：蛋白結(jié)晶條件篩選試劑盒、蛋白結(jié)晶耗材分子生物學(xué)：不同要求PCR試劑盒及單組分產(chǎn)品，DNA LEEDER，限制性內(nèi)切酶、TAE、TBE 更多>

使用Cygnus HCP ELISA試劑盒之前，你需要了解……

宿主細(xì)胞蛋白（HCPs）對(duì)重組蛋白藥物的穩(wěn)定性、安全性和療效具有負(fù)面影響。因此，確保最終藥物的純度和純化工藝的一致性至關(guān)重要，需使用合格且具有廣泛反應(yīng)的HCP ELISA試劑盒。HCP ELISA檢測(cè)試劑盒必須滿足兩個(gè)標(biāo)準(zhǔn)，即具有廣泛的反應(yīng)性，并且通過方法學(xué)驗(yàn)證。Cygnus HCP ELISA試劑盒是行業(yè)的金標(biāo)準(zhǔn)，以下內(nèi)容詳細(xì)介紹了Cygnus HCP ELISA試劑盒的正確實(shí)驗(yàn)操作與方法學(xué)驗(yàn)證流程，幫您高效掌握實(shí)驗(yàn)關(guān)鍵。 正確的洗板操作對(duì)于降低ELISA實(shí)驗(yàn)中的變異和消除背景干擾至關(guān)重要。如果您正在使用自動(dòng)化洗板設(shè)備或?qū)嶒?yàn)結(jié)果的變異程度高于預(yù)期，希望以下文章能幫助您優(yōu)化實(shí)驗(yàn)流程，確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果回歸正常。 如何用正確的洗板方法解決ELISA檢測(cè)結(jié)果漂移的問題？ HCP ELISA檢測(cè)方法必須要通過法規(guī)認(rèn)可的實(shí)驗(yàn)方法（ICH或FDA指南等）進(jìn)行方法學(xué)驗(yàn)證，以確保其能夠產(chǎn)生準(zhǔn)確的結(jié)果。想要獲得準(zhǔn)確的HCP ELISA檢測(cè)結(jié)果，本質(zhì)上是要保證樣品中HCP的濃度高于試劑盒的定量下限（LOQ），同時(shí)HCP的檢測(cè)抗體還要處于過剩狀態(tài)，滿足這兩點(diǎn)就必須要對(duì)檢測(cè)樣品（過程樣品和最終的藥物原液）進(jìn)行稀釋線性驗(yàn)證。因此，稀釋線性（dilution linearity）是驗(yàn)證HCP ELISA方法特異性和準(zhǔn)確性的關(guān)鍵實(shí)驗(yàn)之一。 HCP ELISA方法驗(yàn)證——稀釋線性dilution linearity 在ELISA試劑盒的使用過程中，確保結(jié)果的準(zhǔn)確性至關(guān)重要。為了有效識(shí)別樣品配方與試劑盒組分之間的兼容性，加標(biāo)回收這一關(guān)鍵驗(yàn)證試驗(yàn)顯得尤為重要。它不僅是評(píng)估ELISA試劑盒準(zhǔn)確性的重要工具，也是滿足法規(guī)和藥典（如ICH或FDA指南等）對(duì)商品化ELISA試劑盒方法學(xué)驗(yàn)證要求的可靠方式。 HCP ELISA方法驗(yàn)證——加標(biāo)回收（Spike & Recovery） 空白對(duì)照是指在實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)中設(shè)置的一種陰性對(duì)照，旨在監(jiān)測(cè)非特異性背景信號(hào)，并為基線吸光度值提供參考。在酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（ELISA）中，通過引入空白對(duì)照，可以有效識(shí)別并扣除樣品讀數(shù)中的背景噪聲，從而提高檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。然而，在多分析物ELISA測(cè)定中，由于其固有的高背景信號(hào)特性，這種標(biāo)準(zhǔn)化方法可能并不適用。下文將詳細(xì)探討為何在Cygnus的ELISA測(cè)定中通常不建議使用空白對(duì)照。 使用Cygnus ELISA試劑盒該如何設(shè)置空白對(duì)照？ ELISA是各國(guó)藥典推薦的在生物制品中檢測(cè)殘留HCPs的方法，可以測(cè)定HCPs的總量。并且ELISA的操作簡(jiǎn)便，是經(jīng)典的免疫學(xué)檢測(cè)方法。但ELISA檢測(cè)HCPs也有方法的局限性，比如不能從ELISA的結(jié)果中知道樣品中有哪些HCPs，或者用于檢測(cè)的抗體與哪些HCPs發(fā)生了免疫反應(yīng)。因此，監(jiān)管部門要求在使用ELISA檢測(cè)過程中HCPs殘留含量時(shí)，不僅要通過方法學(xué)驗(yàn)證證明試劑盒的準(zhǔn)確度，精密度，靈敏度等，而且還需要證明使用的HCPs抗體有廣泛的反應(yīng)性，即HCPs抗體覆蓋率。通過AAE-MS方法來識(shí)別最終藥物中的高風(fēng)險(xiǎn)HCPs信息，進(jìn)而確保這些HCPs能夠被檢測(cè)到。在完成以上所有方法學(xué)驗(yàn)證步驟后，該免疫檢測(cè)方法就可用于過程樣品監(jiān)控和產(chǎn)品的批次放行。這個(gè)決策流程對(duì)于開發(fā)和驗(yàn)證通用型或工藝專屬型HCP ELISA方法很有幫助，它展示了如何將正交AAE和MS方法相結(jié)合，通過數(shù)據(jù)來決定哪種類型的檢測(cè)方法更適用于您的項(xiàng)目。 抗體親和提取(AAE?)：革新宿主細(xì)胞蛋白(HCPs)分析的新篇章 更多>

穩(wěn)定的DNA染料-AzDyes 及Green DNA Stain

為了進(jìn)一步完善產(chǎn)品類別，即日起，jena bioscienc將產(chǎn)品名稱為“AF-Dyes”變更為“AzDyes”，"SBR Green" 變更為"Green DNA Stain"及"Green-fluorescent DNA Stain"，除了品名及貨號(hào)的更改，產(chǎn)品的質(zhì)量和品質(zhì)并未有任何變化。 AzDyes傳統(tǒng)染料如熒光素或TAMRA通常會(huì)受到低光穩(wěn)定性及低親水性的影響。而且，這兩個(gè)參數(shù)分別是檢測(cè)靈敏度和生物偶聯(lián)物溶解度的關(guān)鍵參數(shù)。AZDyes（Alexa Fluor&reg;染料的結(jié)構(gòu)類似物）是具有顯著光穩(wěn)定性的和親水性的熒光染料。Jena Bioscience現(xiàn)在能提供功能化的AZDyes和AZDye核苷酸偶聯(lián)物： 品牌品名貨號(hào)規(guī)格Jena BioscienceAZDye488-AzideCLK-1275-AZ-11 mgJena BioscienceAZDye488-AzideCLK-1275-AZ-55 x 1 mgJena BioscienceAZDye488-AlkyneCLK-1277-AZ-11 mgJena BioscienceAZDye488-AlkyneCLK-1277-AZ-55 x 1 mgJena BioscienceAZDye488-Picolyl-AzideCLK-1276-AZ-11 mgJena BioscienceAZDye488-Picolyl-AzideCLK-1276-AZ-55 x 1 mgJena BioscienceAZDye546-AzideCLK-1283-AZ-11 mgJena BioscienceAZDye546-AzideCLK-1283-AZ-55 x 1 mgJena BioscienceAZDye546-AlkyneCLK-1285-AZ-11 mgJena BioscienceAZDye546-AlkyneCLK-1285-AZ-55 x 1 mgJena BioscienceAZDye546-Picolyl-AzideCLK-1284-AZ-11 mgJena BioscienceAZDye546-Picolyl-AzideCLK-1284-AZ-55 x 1 mgJena BiosciencepCp-AZDye555NU-1706-AZ55520 μl (1 mM)Jena BioscienceDBCO-AZDye555CLK-1290-AZ-11 mgJena BioscienceDBCO-AZDye555CLK-1290-AZ-55 x 1 mgJena BioscienceAZDye555-AzideCLK-1287-AZ-11 mgJena BioscienceAZDye555-AzideCLK-1287-AZ-55 x 1 mgJena BioscienceAZDye555-AlkyneCLK-1289-AZ-11 mgJena BioscienceAZDye555-AlkyneCLK-1289-AZ-55 x 1 mgJena BioscienceAZDye555-Picolyl-AzideCLK-1288-AZ-11 mgJena BioscienceAZDye555-Picolyl-AzideCLK-1288-AZ-55 x 1 mgJena BiosciencepCp-AZDye594NU-1706-AZ59420 μl (1 mM)Jena BioscienceDBCO-AZDye594CLK-1298-AZ-11 mgJena BioscienceDBCO-AZDye594CLK-1298-AZ-55 x 1 mgJena BioscienceAZDye594-AzideCLK-1295-AZ-11 mgJena BioscienceAZDye594-AzideCLK-1295-AZ-55 x 1 mgJena BioscienceAZDye594-AlkyneCLK-1297-AZ-11 mgJena BioscienceAZDye594-AlkyneCLK-1297-AZ-55 x 1 mgJena BioscienceAZDye594-Picolyl-AzideCLK-1296-AZ-11 mgJena BioscienceAZDye594-Picolyl-AzideCLK-1296-AZ-55 x 1 mgJena BiosciencepCp-AZDye647NU-1706-AZ64720 μl (1 mM)Jena BioscienceDBCO-AZDye647CLK-1302A-AZ-11 mgJena BioscienceDBCO-AZDye647CLK-1302A-AZ-55 x 1 mgJena BioscienceAZDye647-AzideCLK-1299-AZ-11 mgJena BioscienceAZDye647-AzideCLK-1299-AZ-55 x 1 mgJena BioscienceAZDye647-AlkyneCLK-1301A-AZ-11 mgJena BioscienceAZDye647-AlkyneCLK-1301A-AZ-55 x 1 mgGreen DNA stainGreen DNA Stain是凝膠電泳應(yīng)用中用于DNA分析的優(yōu)質(zhì)DNA染色染料。在與DNA結(jié)合后，非熒光染料變得高度熒光，從而可以檢測(cè)到最低的DNA量。品牌品名貨號(hào)規(guī)格Jena BioscienceGreen DNA stainPCR-2735 x 1,8 mlGreen-fluorescent DNA stain Green-fluorescent DNA stain在結(jié)構(gòu)上與SYBR&reg;Green相似，是一種專門為DNA分析應(yīng)用（包括實(shí)時(shí)PCR（qPCR））開發(fā)的優(yōu)質(zhì)DNA嵌入染料。在與DNA結(jié)合后，非熒光染料變得高度熒光，同時(shí)對(duì)PCR過程沒有抑制作用。該染料在熱穩(wěn)定和水解方面都非常穩(wěn)定，在常規(guī)處理過程中提供了便利。品牌品名貨號(hào)規(guī)格Jena BioscienceGreen-Fluorescent DNA StainPCR-378-1ML1 ml x 100 μMJena BioscienceGreen-Fluorescent DNA StainPCR-378-10ML10 ml x 100 μMJena BioscienceGreen-Fluorescent DNA StainPCR-378-100ML100 ml x 100 μM北京西美杰科技有限公司為Jena Bioscience中國(guó)代理，為客戶提供完善的技術(shù)支持與售后服務(wù)。歡迎撥打西美杰客服電話400-050-4006或者登陸網(wǎng)站www_xmjsci_com.zenprotocolpool.com了解更多信息。Jena Bioscience由德國(guó)馬普所(MPI)的知名分子生物學(xué)家于1998年共同創(chuàng)辦，致力于為全球的科研院所，醫(yī)院，制藥企業(yè)和診斷試劑盒生產(chǎn)企業(yè)提供各類試劑與原料, 供應(yīng)特色標(biāo)記核苷酸/類核苷，標(biāo)記熒光探針、點(diǎn)擊化學(xué)、蛋白結(jié)晶等產(chǎn)品，分別通過DIN EN ISO 9001，DIN EN ISO 14001，EMAS認(rèn)證，質(zhì)量被80多個(gè)國(guó)家客戶認(rèn)可。品牌優(yōu)勢(shì)：以核苷，核苷酸類似物為特色的產(chǎn)品種類齊全：核苷，核苷酸及類似物，蛋白及蛋白表達(dá)系統(tǒng)，點(diǎn)擊化學(xué)試劑，生物大分子結(jié)構(gòu)研究相關(guān)試劑，分子生物學(xué)和生物化學(xué)相關(guān)試劑強(qiáng)大的技術(shù)團(tuán)隊(duì)可提供高質(zhì)量定制服務(wù)產(chǎn)品質(zhì)量有保障，通過多種認(rèn)證產(chǎn)品和服務(wù)被80多個(gè)國(guó)家客戶認(rèn)可主要產(chǎn)品分類：核苷、核苷酸類似物： 標(biāo)記核苷酸、脫氧/雙脫氧核糖核苷酸、核苷酸類似物 點(diǎn)擊化學(xué)：帶有點(diǎn)擊基團(tuán)的核苷酸、熒光素、生物素、ATP類似物等； 蛋白結(jié)構(gòu)相關(guān)產(chǎn)品：蛋白結(jié)晶條件篩選試劑盒、蛋白結(jié)晶耗材 分子生物學(xué)：不同要求PCR試劑盒及單組分產(chǎn)品，DNA LEEDER，限制性內(nèi)切酶、TAE、TBE 更多>

糖蛋白分離純化——APB親和填料

蛋白糖基化是一種非常重要的蛋白質(zhì)后修飾方式。糖基化對(duì)蛋白質(zhì)的理化性質(zhì)和生物功能都可以產(chǎn)生重大影響，生物藥分子的糖基化可能決定了其臨床效果，因此糖基化在生物藥生產(chǎn)中是一個(gè)關(guān)鍵質(zhì)量屬性，必須在開發(fā)和生產(chǎn)過程中密切監(jiān)視，并在工藝中特異性分離或者去除糖基化分子。近些年來，硼酸親和技術(shù)在糖蛋白純化領(lǐng)域得到了快速的發(fā)展，其獨(dú)特的親和性引起了研究人員的極大關(guān)注。由于硼酸基于與順式二醇基團(tuán)可發(fā)生可控的可逆共價(jià)鍵合反應(yīng)，后者在糖蛋白的糖鏈結(jié)構(gòu)中廣泛存在，因而硼酸親和技術(shù)常被用做是一種選擇性富集分離順式二醇化合物的有效提純手段。硼酸親和作用的工作原理如下圖。 APB親和填料是由Astrea Bioseparations公司推出的配基為氨基苯基硼酸鹽的親和層析填料（Aminophenylboronate，簡(jiǎn)稱APB），特別適用于糖蛋白的純化，或從非糖基化分子中去除糖蛋白和碳水化合物雜質(zhì)，從而應(yīng)對(duì)糖蛋白純化工藝中的各種挑戰(zhàn)，此外，APB填料還可用于純化和去除某些酶，例如硼酸基團(tuán)對(duì)活性位點(diǎn)具有親和性的蛋白酶和水解酶等。 APB親和填料有兩種不同的基架可選擇，其中Aminophenylboronate P6XL采用的是Astrea專有的Purabead&reg; P6XL近單分散瓊脂糖微球來生產(chǎn)高度穩(wěn)定的交聯(lián)瓊脂糖基架。 Purabead&reg;產(chǎn)品具有非常均勻的粒徑，可在低背壓條件下實(shí)現(xiàn)可重現(xiàn)的層析柱裝填和高流速。因此，Aminophenylboronate P6XL 是生物工藝應(yīng)用的首選親和填料。Aminophenylboronate A6XL是Astrea的原創(chuàng)產(chǎn)品，該填料的瓊脂糖基質(zhì)具有更寬的粒度分布，更適合小規(guī)模或診斷應(yīng)用。兩種基架都是經(jīng)過優(yōu)化的，有相同的穩(wěn)定的配基和偶聯(lián)物，都適用于各種生物制品的分離和純化。 APB親合填料產(chǎn)品特點(diǎn) 適用于親和純化或去除糖蛋白及聚糖 高純度m-氨基苯硼酸鹽配基 配基通過順式二醇選擇性結(jié)合至碳水化合物基團(tuán)。 高動(dòng)態(tài)結(jié)合載量 填料穩(wěn)定性好，使用壽命長(zhǎng) 可耐受0.5 M NaOH清潔，允許數(shù)百次循環(huán)使用 符合ISO 9001標(biāo)準(zhǔn)，批次穩(wěn)定性重復(fù)性好 提供全面的法規(guī)支持文件（RSF），支持GMP生產(chǎn)和商業(yè)化申報(bào) 已有多個(gè)受監(jiān)管的生物制藥生產(chǎn)和醫(yī)療診斷領(lǐng)域用戶使用。 pH穩(wěn)定性: APB親和填料在pH 3-13（連續(xù)暴露）范圍內(nèi)穩(wěn)定，并且可承受pH 14.0的間歇暴露。 在室溫條件下，在從pH 0.0(1 M HCl) 到pH 14.0 (1M NaOH) 的一系列測(cè)試溶液中孵育的APB A6XL的pH穩(wěn)定性曲線。收集上清液樣品并以連續(xù)暴露1周至1年的特定時(shí)間間隔測(cè)定配基的脫落情況。 流速 APB P6XL的均勻粒徑使該吸附填料能夠在高線性流速下使用。可以使用高達(dá)500 cm/h的操作流速，盡管在層析柱上樣和洗脫期間的流速通常在50–200 cm/h范圍內(nèi)。 APB P6XL（直徑3.2 cm x床高15 cm）的壓力-流速曲線。 結(jié)合載量 APB P6XL/A6XL對(duì)糖蛋白的結(jié)合載量范圍為10–20 μmol/g，對(duì)碳水化合物的結(jié)合載量高達(dá)30 μmol/g。 操作條件 糖蛋白與APB親和填料的結(jié)合在低至中等離子強(qiáng)度（10–300 mM）和弱堿性pH條件（pH 范圍8.0–9.5）下最佳。可以使用磷酸鹽制備的緩沖液，推薦使用硼酸鹽和甘氨酸進(jìn)行柱平衡。建議結(jié)合流速在50–150 cm/h之間。吸附填料的結(jié)合載量取決于樣品的性質(zhì)，對(duì)于糖蛋白來說，通常在10–20 μmol/g的范圍內(nèi)。 通過使用低pH緩沖液或通過使用競(jìng)爭(zhēng)性二醇，可以從APB親和填料中洗脫結(jié)合的蛋白質(zhì)。可以使用pH4.0的0.1 M甘氨酸/HCl或0.1 M醋酸鹽緩沖液降低pH值進(jìn)行洗脫。對(duì)于酸不穩(wěn)定性蛋白質(zhì)，可以使用合適的競(jìng)爭(zhēng)性二醇，例如20–200 mM山梨醇，在中性pH緩沖液中進(jìn)行洗脫。 APB親和填料參數(shù) 步驟 條件 平衡/裝柱緩沖液 50 mM磷酸鈉，pH 9.0緩沖液 蛋白質(zhì)制備 在平衡緩沖液中制備蛋白質(zhì)，并用≤0.45 μm的濾器預(yù)過濾。 操作流速 50-200 cm/h 洗脫 20–200 mM山梨醇或0.1 M甘氨酸/HCI或0.1M醋酸緩沖液，pH 4.0 CIP 0.5–1.0 M氫氧化鈉 預(yù)平衡 平衡緩沖液 消毒 0.5 M NaOH 儲(chǔ)存 20% 乙醇 應(yīng)用案例 用APB P6XL純化胎球蛋白 胎球蛋白是胎牛血清中的主要59 kDa糖蛋白，含有三個(gè)N-鏈和O-鏈碳水化合物側(cè)鏈。該案例介紹了使用APB P6XL層析柱從商品化粗溶液中純化胎球蛋白。 層析色譜圖 胎球蛋白層析條件參數(shù)： 層析柱高度：4 cm 柱體積：3.1 mL 線性流速：50 cm/h 平衡&漂洗緩沖液：50 mM磷酸鈉，pH 9.0 洗脫：山梨醇梯度(0–200mM) 消毒：1M NaOH 重組糖蛋白的捕獲 APB層析填料特別適用于糖蛋白的捕獲和純化。下圖展示了一個(gè)經(jīng)典的親和純化色譜圖，其中有一個(gè)大的流穿和一個(gè)小的離散洗脫峰。在50 mM山梨醇洗脫后達(dá)到完全的目標(biāo)糖蛋白回收。 層析色譜圖 層析條件參數(shù)： 層析柱：直徑1.0 cmx柱床高7.4 cm 平衡漂洗/緩沖液：50 mM甘氨酸/NaOH pH 9.0 洗脫：50 mM 磷酸鹽緩沖液，0-200 mM山梨醇梯度 消毒：0.5 M氫氧化鈉 流速：200 cm/h APB A6XL純化的糖蛋白Western blot結(jié)果圖（泳道1 分子量marker，泳道2 上樣到APB A6XL的樣品，泳道3 流穿液，泳道4-8 梯度洗脫液） 訂購(gòu)信息 Aminophenylboronate P6XL 貨號(hào) 填料規(guī)格 產(chǎn)品形式 3355-00025 25 mL 散裝填料 3355-00100 100 mL 3355-00500 500 mL 3355-01000 1 L 3355-05000 5 L 3355-10000 10 L 6716 1 x 1 mL 預(yù)裝柱 6616 4 x 1 mL 6717 1 x 5 mL 6617 4 x 5 mL Aminophenylboronate A6XL 貨號(hào) 填料規(guī)格 產(chǎn)品形式 0355-00025 25 mL 散裝填料 0355-00100 100 mL 0355-00500 500 mL 0355-01000 1 L Astrea Bioseparations于1987年孵化自劍橋大學(xué)，擁有超過30年層析介質(zhì)研發(fā)和生產(chǎn)經(jīng)驗(yàn)，是世界級(jí)層析介質(zhì)產(chǎn)品與服務(wù)供應(yīng)商。目前使用Astrea的產(chǎn)品已有超過21個(gè)生產(chǎn)工藝通過了FDA和EMA的批準(zhǔn)。Astrea Bioseparations在全球擁有3個(gè)研發(fā)和生產(chǎn)基地，專注為生物大分子和CGT領(lǐng)域提供行業(yè)領(lǐng)先的層析介質(zhì)和技術(shù)服務(wù)。Astrea Bioseparations推出的基于納米纖維的新型層析技術(shù)，解決了傳統(tǒng)生物分離工具載量低和工藝耗時(shí)問題，實(shí)現(xiàn)更快、更環(huán)保、更具成本效益的純化過程，完全符合當(dāng)今生物治療創(chuàng)新的需求。西美杰是Astrea Bioseparations中國(guó)區(qū)代理，為用戶提供完善的技術(shù)支持與售后服務(wù)。歡迎隨時(shí)撥打西美杰客服熱線400-050-4006或登錄網(wǎng)站www_xmjsci_com.zenprotocolpool.com了解更多信息。 更多>

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北京西美杰科技有限公司（Beijing XMJ Scientific Co.,Ltd，以下簡(jiǎn)稱西美杰）于2006年成立，由留美歸國(guó)生物領(lǐng)域?qū)I(yè)人士創(chuàng)辦。西美杰堅(jiān)持自己的經(jīng)營(yíng)理念，勤奮踏實(shí)地整合全球產(chǎn)品資源與技術(shù)資源，為高校、科研院所的科研工作者以及生物制品生產(chǎn)企業(yè)提供一站式產(chǎn)品服務(wù)方案，幫助科研及企業(yè)單位縮短科研時(shí)間... 更多>

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